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| 赛默飞世尔参与推出禽流感快速高通量检测新技术
2/22/2009 8:41:00 PM |
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2009年2月18日，中国上海——赛默飞世尔科技（纽约证交所代码：TMO）旗下产品KingFisher系列自动化磁珠提取纯化仪器，联合Invitrogen公司Ambion病毒RNA提取试剂盒，将传统方法的禽流感检测由21天缩短至4小时左右。此技术经过美国国家兽医服务实验室（NVSL）验证，是美国农业部认可的禽流感检测的分子生物学方法。该技术已由赛默飞世尔公司引进中国，将对促进我国禽产品的出口创汇、降低成本和疫情早期诊断具有重大意义。
禽流感快速高通量检测新技术是基于分子生物学的方法，在病毒感染的初期即可快速确诊病毒的存在。该方法包括两大主要步骤。第一步，联合使用赛默飞世尔公司的KingFisher自动化磁珠提取纯化仪器，及Invitrogen公司的Ambion病毒RNA提取试剂盒，进行自动化的病毒RNA提取。该步骤需要约30分钟。第二步，实时定量RT-PCR检测病毒RNA。该步骤需要约3小时。整体方法经过优化，并经过超过200,000禽类咽喉拭子样品的检测验证。
这项技术可以用于从生物体液和无细胞样品中，如血清、血浆、口腔拭子和细胞培养液中，提取病毒RNA。从无细胞样品中分离纯化RNA比从组织和培养细胞中分离纯化RNA更具挑战性。这是因为低的病毒滴度、大的操作体积和样品的复杂性，且操作步骤必须适合实时定量RT-PCR。使用自动化磁珠提取方法可满足上述各项要求，赛默飞世尔公司的KingFisher专利磁珠提取技术，不需有机溶剂或RNA沉淀步骤，消除了基于滤膜的方法经常碰到的问题，如滤膜堵塞、大的洗脱体积和不稳定的产率。而结合后续的实时定量RT-PCR，可仪检测到低至10拷贝的病毒RNA，极大提高了禽流感病毒检测的灵敏度。
禽流感快速高通量检测新技术比较传统方法的优势
•灵敏度极高，可从100-400ul样品中分离到少至10拷贝的病毒RNA
•对于96个样品，整个磁珠提取纯化过程不超过30分钟，整个禽流感检测过程不超过4个小时
•用于低病毒浓度时尤其理想
•线性纯化效率低至50转录子
•经美国国家兽医服务实验室（NVSL）认证可用于AI/ND病毒
线性纯化效率可低至10拷贝的转录子
用MagMAX病毒RNA提取试剂盒，可以从血浆和血清中定量纯化病毒RNA，线性范围大于约5个数量级。这可由血浆、血清和水样品的试验体系中，以系列稀释的RNA作对照。图一的定量RT-PCR结果说明RNA的纯化率在很大的病毒浓度的范围内均为线性，含少至10个拷贝的转录子的样品也可被纯化。
基于磁珠的纯化技术的好处
磁珠用于从细胞中纯化RNA和从无细胞样品中纯化病毒RNA有许多好处。RNA产率更稳定，不仅是实验到实验间的差异极小，而且是大范围的样品尺寸所得到的RNA产率也很稳定。磁珠技术消除了因细胞聚集而产生滤膜堵塞的情况，因为高效的磁珠结合仅需很小体积的磁珠，所以结合的RNA用20-50ul的不含核酸酶的水就可以洗脱。这使得磁珠纯化技术对于从大体积、稀释样品中浓缩RNA极其有用。KingFisher专利的磁珠提取纯化技术，用转移磁珠代替了转移溶液，因此具有更高的提取纯化效率和产率。
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赛默飞世尔科技（中国）有限公司(Thermo Fisher Scientific)联系方式：
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| 网址： |
http://www.thermo.com.cn
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电话：86-21-68654588 |
| 地址： |
中国·上海·上海浦东新金桥路27号6号楼 |
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